BUNSEN本生2.0ml凍存管的使用，你知道嗎？

更新時(shí)間：2022-08-25 點(diǎn)擊次數(shù)：734

　　2.0ml凍存管能耐受-196℃低溫的聚丙烯制成,有硅膠環(huán)以保證密封,所有可立凍存管底部經(jīng)特殊設(shè)計(jì),可固定在凍存架或托盤上供單手操作,無菌,無熱源認(rèn)證。

　　2.0ml凍存管樣品的制備：

　　1、培養(yǎng)細(xì)胞蛋白質(zhì)樣品的制備：

　　(1)在合適的鹽濃度下，應(yīng)保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復(fù)性。

　　(2)選擇合適的表面活性劑和還原劑，破壞所有非共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物和共價(jià)鍵二硫鍵，使其形成一個(gè)各自多肽的溶液。

　　(3)盡量去除核酸，多糖，脂類等干擾分子。

　　(4)防止蛋白質(zhì)在樣品處理過程中的人為的修飾，制備過程應(yīng)在低溫下進(jìn)行，以避免細(xì)胞破碎釋放出的各種酶類的修飾(建議加入合適的蛋白酶抑制劑)

　　(5)樣品建議分裝成合適的量，然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存，但要注意不要反復(fù)凍融。

　　2、組織樣品的制備：

　　手術(shù)切除的組織塊迅速置于預(yù)冷的0.95生理鹽水中，漂洗數(shù)次，以清潔表面的血跡，將組織稱量后切成幾個(gè)較小的組織塊放入機(jī)戒組織勻漿器中，按組織凈重，加入相應(yīng)體積的裂解液進(jìn)行勻漿，離心收集上清加入Laemmli樣品緩沖液強(qiáng)力混勻，樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘，10000g離心10分鐘，取上清液，將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中，至此，電泳樣品已準(zhǔn)備就緒。

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